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石蜡切片作用 石蜡切片的原理和基本步骤?

石蜡切片作用

石蜡切片作用 石蜡切片的原理和基本步骤?

石蜡切片的原理和基本步骤?

石蜡切片的原理和基本步骤?

1. 固定:

将新鲜的组织切成小块,固定在4块\\一夜之间多聚甲醛。凝固组织中的物质成分,尽量保持其活体结构。同时可使组织硬化,有利于切片。

2.脱水:

为了减少组织材料的急剧收缩,应按从低浓度到高浓度增加70的顺序进行。\\%、85\\%、95\\直到纯酒精(无水乙醇),每次时间为1小时。固定的组织材料需要去除组织中留下的固定液体及其结晶沉淀,否则会影响后期的染色效果。

3.透明:

常用的透明剂有二甲苯,二甲苯是石蜡的溶剂。纯酒精不能溶解在石蜡中,组织中的酒精需要用溶解在酒精和石蜡中的溶剂来代替。在透明剂浸渍过程中,材料块被称为透明。

4.浸蜡:

首先将组织材料块放入熔融石蜡和二甲苯的等量混合物中浸泡1小时。先后移入2个熔融石蜡液中浸泡约1小时。

5.包埋:

用少许热蜡液将其底部迅速贴在包埋上,再放在速冻台上,让石蜡固定。

6.切片:

切片刀的锐度和蜡块的硬度是否合适,直接影响切片的质量。蜡块的硬度可以在冷水中改变。通常切片厚度为3-5um,在37度水浴中轻轻放置毛笔。

7.贴片和烤片:

恒温水浴一般用于温度控制在37-40℃左右,有利于石蜡切片的展开,将贴好的切片放在60块℃在恒温箱中干燥2小时,蛋白质凝固后即可染色。

8.切片脱蜡和水化:

干燥后的切片在二甲苯中脱蜡,然后按照纯酒精和95的顺序从高浓度降低到低浓度\\%、85\\%、70\\水化的%。

9.染色:

经典的苏木精和伊红:细胞核被苏木精染成紫蓝色,大部分细胞质和非细胞成分被伊红染成粉红色。实验操作简单。

免疫组化:指具有显色剂标记的特异性抗体通过抗原抗体反应和组织化学在组织细胞原位的显色反应。

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